COMPOSITION OF ESSENTIAL OIL OF TANACETUM VULGARE L. FROM SAMARA REGION

Full Text

■ ВВЕДЕНИЕ В настоящее время при лечении многих хронических заболеваний широко применяются препараты на основе лекарственного растительного сырья (ЛРС). Современные фитопрепараты, как правило, сочетают в себе высокую эффективность, относительную безопасность и широту терапевтического действия. Однако многие лекарственные растения (ЛР) остаются недостаточно изученными в плане химического состава, фармакологических свойств, стандартизации. К таким растениям можно отнести пижму обыкновенную (Tanacetum vulgare L.) и препаратам на ее основе, используемым в качестве желчегонных средств. Пижма обыкновенная включена в фармакопеи Российской Федерации [1, 2], Бельгии, Португалии, Финляндии [3], Украины, Белоруссии [4]. В качестве сырья в Российской Федерации заготавливают цветки пижмы обыкновенной. На данный момент в действующей фармакопейной статье (ГФ РФ XIII издания, ФС.2.5.0031.15 «Пижмы обыкновенной цветки») предусмотрено определение суммы флавоноидов и фенолкарбоновых кислот, однако, на наш взгляд, необходимо дифференцировать эти группы биологически активных соединений и отдельно определять сумму флавоноидов, которые преимущественно и обусловливает фармакологический эффект препаратов пижмы обыкновенной [1]. Одной из значимых групп биологически активных соединений в цветках пижмы обыкновенной является также эфирное масло, определяющее антибактериальное, противоглистное действие. По литературным данным, компонентный состав эфирного масла пижмы очень разнообразен: доминируют бициклические монотерпеновые кетоны ф-туйон и а-туйон), в значительных количествах содержатся камфора, пинен, туй-ол, п-цимол, борнеол, камфен, лимонен и др. [5-7]. Известно также, что компонентный состав эфирного масла пижмы обыкновенной может отличаться в зависимости от региона произрастания [7]. ■ ЦЕЛЬ Изучение состава эфирного масла цветков пижмы обыкновенной, произрастающей в Самарской области, для последующего обоснования подходов к пробопод-готовке и качественному анализу исследуемого ЛРС. № п/п Компонент RT, мин Содержание, % от цельного эфирного масла Содержание в паровой фазе, % Содержание, % от суммы площадей компонентов в гексановом извлечении 1. р-туен 12,20 0,03 2,33 - 2. сантолина триен 12,43 0,11 0,60 - 3. а-пинен 12,55 0,22 7,66 - 4. камфен 13,42 0,37 0° СО со - 5. бензальдегид 14,37 0,04 0,03 - 6. сабинен 15,22 2,28 25,94 - 7. р-пинен 16,7 0,08 0,15 - 8. а-фелландрен 17,36 0,03 - 9. йомоги-спирт 17,40 13,65 1,45 - 10. а-терпинен 18,23 0,57 0,42 - 11. м-цимен 18,86 1,82 2,83 - ■ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объектами исследования послужили образцы сырья - цветков пижмы обыкновенной (Tanacetum vulgare L.), заготовленные в июле 2016 г. в г. Самара. Эфирное масло получали в соответствии с ОФС.1.5.3.0010.15 (ГФ РФ XIII издания), метод 1. При проведении парофазного анализа образец цветков пижмы обыкновенной массой 1 г помещали в пенициллиновый флакон, которые герметично закрывали резиновой пробкой с фторопластовой прокладкой. Контейнер с образцом термостатировали при температуре 100°С в течение 60 мин. Для изучения компонентов эфирного масла, которые переходят в извлечение из сырья во время экстракции спиртоводными смесями, 1,0 г сырья помещали в коническую колбу со шлифом вместимостью 50 мл, добавляли 10 мл 70% этилового спирта и выдерживали на кипящей водяной бане в течение 15 мин с обратным холодильником. После охлаждения полученное спиртоводное извлечение обрабатывали двукратно гексаном порциями по 5 мл, каждый раз отделяя верхний (гек-сановый) слой. Объединенное гексановое извлечение упаривали до объема примерно 1 мл. Компонентный состав определяли с помощью газового хроматографа «МАЭСТРО 7820» с масс-спектрометром модели Agilent 5975 и автоинжектором. Анализ проводили с использованием капиллярной кварцевой колонки HP-5ms 30 м х 0,25 мм х 0.,25 мкм (неподвижная фаза: 5%-дифенил-95%-диметилсилоксан) фирмы Agilent. Условия хроматографирования [8]: 1) программирование температуры термостата колонок: изотерма 40°C в течение 5 мин - нагрев до 80°C со скоростью 2°С/мин - нагрев до 150°C со скоростью 7°С/мин - нагрев до 280°С со скоростью 10°С/мин -изотерма 280°C в течение 10 мин.; 2) температура испарителя 270°C; 3) температура источника ионов 150°C; 4) температура квадруполя 230°С; 5) температура переходной камеры 280°С; 6) сброс 1:20; 7) объем вводимой газовой пробы 1000 мкл.; 12. лимонен 19,02 - 0,30 - 13. эвкалиптол 19,31 12,12 19,21 - 14. фенилацетальдегид 20,28 0,04 - - 15. у-терпинен 21,31 2,02 1,08 - 16. артемизиа-спирт 23,69 5,14 13,22 - 17. сабинен гидрат 24,08 0,15 - 18. туйон и изотуйон 24,65 19,09 13,91 2,73 19. п-ментен-2-ол-1 25,88 0,49 - - 20. камфора 26,88 7,69 3,52 0,84 21. борнеол 28,06 1,64 - - 22. лавандулол 28,36 0,30 - - 23. терпинен-4-ол 28,69 5,95 0,06 0,94 24. а-терпинеол 28,98 3,46 0,04 - 25. сабинил ацетат 29,88 0,21 - - 26. п-ментадиен-6,8-ол-2 (карвеол) 30,04 0,03 - - 27. куминовый альдегид 30,66 0,12 - - 28. цис-цитраль 30,77 0,02 - - 29. карвон 30,80 0,02 - - 30. гераниол 31,18 0,13 - - 31. нераль 31,63 0,03 - - 32. борнилацетат 32,01 0,15 - - 33. тимол 32,06 0,09 - - 34. куминовый спирт 32,14 0,04 - - 35. эвгенол 33,76 0,21 - - 36. нерил ацетат 33,93 0,04 - - 37. копаен 34,20 0,06 - - 38. кариофиллен 35,15 0,78 - 1,98 39. у-мууролен 35,71 0,10 - - 40. р-фарнезен 35,9 0,30 - 1,83 41. р-кубебен 36,64 3,46 - 23,68 42. эликсен 37,02 0,50 - 1,35 43. миртенилацетат 37,10 - 0,59 44. р-кадинен 37,73 0,28 - - 45. неролидол 38,93 0,69 - 2,39 46. спатуленол 39,46 - 1,60 47. даванон 39,93 5,64 - - 48. кариофилленоксид 42,98 0,04 - - 49. 9-эйкозан 44,48 - - 0,64 50. 1-октадецен 44,58 - - 0,79 51. тетрадеканаль 44,96 - - 0,97 52. гексагидрофарнезил ацетон 45,40 - - 0,51 53. гексадекановая кислота 46,92 - - 2,31 54. 1-октадецен 47,33 - - 0,71 55. октадеканаль 47,65 - - 1,07 Примечание: Приведены усредненные данные по результатам нескольких анализов (n=5). Таблица 1. Компонентный состав эфирного масла пижмы обыкновенной 8) объем вводимой жидкой пробы 1 мкл. Для идентификации компонентов определяли линейные индексы удерживания, сопоставляли полученные результаты и полные масс-спектры с библиотечными (библиотеки масс-спектров «NIST 2.0») и литературными данными. Рассматривались только компоненты, определяемые по библиотеке с вероятностью более 90%. Количественный анализ проводили по площадям соответствующих пиков на хроматограмме, построенной по полному ионному току. ш результаты и их обсуждение С использованием метода хромато-масс-спектрометрии показано, что в эфирном масле пижмы обыкновенной содержится не менее 45 компонентов, из них 31 имеют концентрацию более 0,1% от цельного масла. Основными компонентами являются смесь туйона и изотуйона (19,09%), эвкалиптол (12,12%) и йомоги спирт (13,65%) (рис. 1 и табл. 1). При парофазном анализе в составе газового экстракта идентифицировано 19 компонентов, основными из которых являются сабинен (25,94%), эвкалиптол (19,21%), артемизиа-спирт (13,22%), и смесь туйона и изотуйона (13,91%) (рис. 2 и табл. 1). Изменение соотношения компонентов, вероятно, обусловлено тем, что в газовую фазу поступают более легколетучие соединения. При анализе гексанового извлечения отмечено изменение соотношения компонентного состава в сторону менее летучих соединений. В составе извлечения обнаруживались жирные кислоты, стерины, ненасыщенные углеводороды. Из терпеноидных соединений доминировали туйон, изотуйон и р-кубебен (рис. 3 и табл. 1). Рисунок 1. Хроматограмма, полученная при ГХ-МС анализе эфирного масла цветков пижмы обыкновенной. Следует отметить, что полученные данные отличаются от результатов исследования компонентного состава пижмы, произрастающей на территории Красноярского края и Оренбургской области, что, вероятно, обусловлено региональными особенностями. Основным компонентом эфирного масла пижмы, произрастающей на территории Красноярского края, является камфора (содержание варьировало от 55% до 65%), варьировали в значительных пределах а- и р-пинены, сабинен, а- и у-терпинены и др. В эфирном масле цветков пижмы, заготовленных в Оренбургской области, преобладали эвкалиптол, камфора, сабинен [6]. ■ ВЫВОДЫ 1. Проведено исследование компонентного состава эфирного масла пижмы обыкновенной, произрастающей на территории Самарской области. 2. Установлено, что основными компонентами эфирного масла являются два изомера туйона, эвкалиптол Рисунок 2. Хроматограмма, полученная при парофазном анализе цветков пижмы обыкновенной. Рисунок 3. Хроматограмма, полученная при ГХ-МС анализе гексанового извлечения. и йомоги-спирт. При ПФА соотношение меняется в сторону более летучих соединений (артемизиа-спирт, сабинен, эвкалиптол). 3. Результаты показывают важность унификации методик пробоподготовки при оценке «фингерпринта» растительного сырья. W

About the authors

V A Kurkin

Samara State Medical University

Email: Kurkinvladimir@yandex.ru
PhD, Professor, head of the Department of Pharmacognosy with Botany and Bases of Phytotherapy of Samara State Medical University. ap. 320, 271 Novo-Vokzalnaya st., Samara, Russia, 443029

O V Sazonova

Samara State Medical University

Email: ov_2004@mail.ru
PhD, Associate Professor, director of the Research Institute of Hygiene and Human Ecology of Samara State Medical University.

A V Kurkina

Samara State Medical University

Email: kurkina-av@yandex.ru
PhD, Associate Professor, associate professor of the Department of Pharmacognosy with Botany and Bases of Phytotherapy of Samara State Medical University.

T K Ryazanova

Samara State Medical University

Email: ryazantatyana@mail.ru
PhD, teaching assistant of the Department of Pharmaceutical management and economics of Samara State Medical University.

A I Khusainova

Samara State Medical University

Email: alia.hi@mail.ru
PhD, teaching assistant of the Department of Pharmaceutical management and economics of Samara State Medical University.

References

Supplementary files