IMMUNOLOGICAL AND MICROBIOLOGICAL STATUS OF THE ORAL CAVITY IN ELDERLY PATIENTS USING REMOVABLE LAMINAR DENTURES

Full Text

■ ВВЕДЕНИЕ Слизистая оболочка полости рта при частичном и полном отсутствии зубов довольно значительно отличается по морфологическим, микробиологическим и иммунологическим критериям от слизистой оболочки при наличии зубов. Отсутствие зубов нарушает рефлекторную взаимосвязь с органами полости рта: меняется состав и свойства ротовой жидкости. При клиническом осмотре полости рта больных с частичным или полным отсутствием зубов можно заметить атрофические изменения, участки десквамации, уменьшается конфигурация слизистой оболочки полости рта. У ряда пациентов можно выявить атрофию мелких слизистых желез. Все это инициирует хроническое воспаление, дисбиотиче-ские расстройства и как следствие - иммунные нарушения [1, 2, 3]. Отдельно следует обратить внимание, что в патологических процессах на слизистой оболочке полости рта при использовании съемных протезов преобладающими группами микроорганизмов являются не облигатные анаэробы (как, например, в случае с патологическими процессами в тканях десны или зубов), а факультативно-анаэробные и аэробные бактерии [4-8]. С учетом вышесказанного изучение иммунологической картины и изучение формирования микробиоценоза слизистой оболочки полости рта у пациентов, которые используют съемные зубные протезы, на наш взгляд, является актуальным. ■ ЦЕЛЬ Анализ иммунологических и микробиологических показателей полости рта у пациентов пожилого возраста, использующих полные и частичные съемные пластиночные протезы. ■ МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Для исследования были привлечены 42 пациента с сочетанием полного и частичного отсутствия зубов. Из них 27 женщин и 15 мужчин в возрасте от 60 до 74 лет. Все пациенты использовали как полные, так и частичные съемные пластиночные протезы. Средний срок пользования съемными протезами у пациентов, входящих в исследование, составил 5 лет. Всем пациентам проводили микробиологические и иммунологические исследования полости рта. Исследование микрофлоры слизистых оболочек полости рта у пациентов проводилось в бактериологической лаборатории клиник СамГМУ. Сбор и транспортировку материала от пациентов осуществляли в соответствии с требованиями МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории». Сбор проб со слизистой оболочки ротовой полости проводили утром натощак до приема пищи после утреннего туалета ротовой полости (после чистки зубов пастой без бактерицидных или бактериостатических добавок - фтор, дезинфицирующий набор трав) и ополаскивания рта теплой кипяченой водой. Для сбора материала использовали зонд-тампоны из транспортировочных пробирок со средами для хранения и транспортировки биологического материала для микробиологического исследования. Рисунок 1. Качественный состав микрофлоры слизистой оболочки полости рта у пациентов. www.innoscience.ru Материал собирали сухим стерильным ватным зонд-тампоном тщательно и достаточно жестко со слизистой оболочки щек, языка, основания языка и десен. Материал доставлялся в лабораторию в течение суток в изотермических условиях при комнатной температуре. После получения материала в лаборатории готовили мазки и окрашивали их по методу Грама для оценки морфологии микроорганизмов. Посев осуществлялся на плотные питательные среды (кровяной агар, агар Сабуро, мясо-пептонный агар, желточно-солевой агар), а также в полужидкую тиогликолевую среду. Из колоний готовили мазки и окрашивали их по методу Грама. Дальнейшую идентификацию микроорганизмов проводили по биохимическим свойствам с использованием тест-систем коммерческого производства. Всего было проанализировано 42 результата микробиологических исследований микрофлоры ротовой полости. Для изучения состояния местного иммунитета полости рта исследовали ротовую жидкость у пациентов с сочетанием частичного и полного отсутствия зубов. Материалом служила нестимулированная смешанная слюна. Перед взятием материала пациенту предлагали прополоскать рот кипяченой водой комнатной температуры. Для забора материала в каждом случае использовали стерильные флаконы. Слюну подвергали центрифугированию при 3000 об/мин в течение 15 мин, после чего замораживали при температуре минус 70°. Для оценки состояния местного иммунитета полости рта: определяли содержание лизоцима, секреторного IgA, альфа-дефензина, исследовали концентрацию цитокинов человека IL-1p, IL-2, IL-4, IL-5, IL-8, IL-10, TNFa, изучали бактериальную активность слюны. ■ РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ При анализе микрофлоры обращали внимание на ее качественный состав, количество преобладающих микроорганизмов, их соотношение. Преобладающими группами микроорганизмов у всех обследованных пациентов, входящих в исследование, были энтерококки, моракселлы, грибы рода Candida, пневмококки и энтеробактерии. Встречаемость микроорганизмов в процентном соотношении у пациентов графически представлена на рисунке 1. Полученные данные свидетельствуют о выраженном нарушении микробиоценоза слизистой оболочки полости рта у пациентов, которые были включены в исследование. Это может быть обусловлено нарушением глотания и жевания из-за соответствующих обширных дефектов зубных рядов, длительным использованием съемных зубных протезов, нарушениями в гигиене полости рта при использовании съемных протезов. Важно отметить, что среди превалирующих микроорганизмов в микрофлоре полости рта у пациентов, помимо постоянных обитателей слизистой оболочки полости рта, которые встречаются в норме у человека (условно-патогенные стрептококки, стафилококки, пневмококки, лактобактерии, моракселлы) были выделены непостоянные и патогенные микроорганизмы. К последним следует отнести энтеробактерии, неферментирующие грамотрицательные бактерии (НФГОБ), энтерококки, золотистый стафилококк. Перечисленные микроорганизмы были выделены в значительных количествах: 105-106 колониеобразующих единиц (КОЕ) на тампон (1 мл), что является дополнительным фактором риска в развитии патологических изменений в слизистой оболочки полости рта различного характера. Особенно необходимо обратить внимание на достаточно большое количество микрофлоры, входящей в состав микробиоценоза кишечника человека (энтеробактерии и энтерококки). В норме этих микроорганизмов не должно быть на слизистой оболочке полости рта в составе основной микрофлоры. В качестве непостоянных обитателей максимально допустимые титры для этих микроорганизмов составляют 10102 КОЕ на тампон (1 мл). Микроорганизмы Микрофлора полости рта пациентов входящих в исследование Нормальные показатели микрофлоры полости рта Количество Частота Количество Частота в 1 мл (КОЕ) обнаружения (%) в 1 мл (КОЕ) обнаружения (%) Enterococcusspp. 105-106 46,6 10-103 30,0 Moraxellacatarrhalis 105-106 50,0 105-108 100,0 Candidaspp. 103-104 40,0 102-103 50,0 Энтеробактерии 105-106 30,3 10-102 10,0 Streptococcuspneumonie 105-106 43,3 103-104 60,0 Streptococcusspp. 103-105 23,3 105-108 100,0 Staphylococcus aureus 105-106 23,3 - - Staphylococcus spp. 105-106 30,0 103-104 80,0 Lactobacillus spp. 103-104 20,0 103-104 90,0 НФГОБ 105-106 16,6 10-102 2,0 Таблица 1. Качественный состав микрофлоры слизистой оболочки полости рта у пациентов В нашем случае можно сделать вывод о том, что данная группа микроорганизмов у пациентов стала полноценными обитателями полости рта - перешла в состав резидентной флоры. Неферментирующие грамотрицательные бактерии (НФГОБ) также могут быть причиной гнойно-воспалительных заболеваний полости рта, вызывать поражение слизистой оболочки. Несмотря на то, что их количественные характеристики в качестве транзиторных обитателей полости рта не определены, титры 104-106 КОЕ, выявленные у пациентов, указывают на значительное участие данной группы микроорганизмов в формировании микробиоценоза слизистой оболочки полости рта. Грибы рода Candida могут в норме встречаться на слизистой оболочке полости рта, и их количество не должно превышать 103 КОЕ на тампон (1мл). Однако в нашем исследовании было выявлено, что в среднем данная группа грибов была выявлена в титре 103104 КОЕ на тампон (1 мл). Данный факт свидетельствует о создании благоприятных условий развития кандидозного поражения слизистой оболочки полости рта у пациентов. Повышение титров условно-патогенных микроорганизмов из числа постоянных обитателей слизистой оболочки полости рта до титров 105-106 КОЕ для пневмококков и стафилококков свидетельствует о значительной нагрузке на постоянную микрофлору факторов, снижающих ее колонизационную резистентность, а как следствие - изменение качественного показателя микробиоценоза полости рта в сторону случайных непостоянных обитателей. Количественный состав микрофлоры полости рта у пациентов входящих в исследование представлен в таблице 1. Оценивая результаты по изучению местного иммунитета полости рта, можно сделать заключение, что у пациентов,входящих в исследование, имелось хроническое воспаление полости рта. Это подтверждается содержанием а-дефензина в смешанной слюне на уровне 268±27,3 (нг/мл). Содержание дефензима четко отражает степень дисбиотических нарушений в полости рта. На сегодняшний день достоверным показателем иммунологических изменений являются показатели цитокинов. Изучение профиля цитокинов ротовой жидкости также подтверждает хроническое воспаление полости рта у пациентов с сочетанием частичного и полного отсутствия зубов. Результаты содержания ци- Цитокины Показатели IL-1 р 201,3±32,2 IL-2 214,9±4,2 IL-4 98,9±8,0 IL-5 24,0±2,7 IL-8 66,9±7,4 IL-10 16,9±4,4 TNFa 4,4±1,2 Таблица 2. Содержание цитокинов слюны токинов в слюне у пациентов, использующих съемные протезы, представлены в таблице 2. Результаты таблицы демонстрируют диссонанс ин-терлейкинового статуса, о чем свидетельствует содержание провоспалительных и противовоспалительных цитокинов. Также о низкой неспецифической иммунной защиты полости рта свидетельствуют низкие показатели секреторного IgA (79±9,2 мг/мл) и лизоцима (12,1±2,9 мкг/мг). Бактериальная активность слюны составила 7,1±1,3%. Полученные результаты иммунологических исследований указывают на хронический вялотекущий процесс, диссонанс интерлейкинового статуса и дисбио-тическое нарушение. ■ ЗАКЛЮЧЕНИЕ Полученные результаты микробиологического исследования слизистой оболочки полости рта у пациентов пожилого возраста, использующих съемные пластиночные протезы, демонстрируют значительные изменения дисбиотического характера в постоянной и непостоянной микрофлоре - как по количественным, так и по качественным показателям.Изучение показателей местного иммунитета полости рта у больных с частичным и полным отсутствием зубов показал выраженный дисбаланс цитокинового ответа, что подтверждает хроническое антигенное, микробоассоциированное раздражение и проявляющееся перманентное хроническое воспаление.

About the authors

MI I Sadykov

Samara State Medical University

Email: sadykov1949@mail.ru
PhD, professor of the Department of Prosthetic Dentistry, Samara State Medical University

DA A Trunin

Samara State Medical University

Email: trunin-027933@yandex.ru
PhD, professor of the Dental Department of the Institute of Professional Education, Samara State Medical University

AM M Nesterov

Samara State Medical University

Email: stoma2001@yandex.ru
PhD, associate professor of the Department of Prosthetic Dentistry.

MS S Сhistyakova

Samara State Medical University

Email: mari2494@yanex.ru
5th-year student of the Department of Dentistry.

References

Supplementary files